大肠杆菌（O1）PCR检测试剂盒说明书

技术特点：
1准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果*性大于99%。
2高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速：整个检测流程只需3小时。
4简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需*配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光

产品名称：大肠杆菌(O1)PCR检测试剂盒说明书
规格：50T
编号：BJ-P4221
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

1

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可*保存，但应避免反复冻融（zui多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
操作方法：
1直接测定
2测定准备
3背景对照测定
4样品活性测定
5计算样品活性
备注：
1．本产品为50次操作
2．操作时，须戴手套
3．操作时，避免污染母液
4．即刻进行荧光检测分析 
5．本产品染色剂不易洗掉，染色持久
6．本公司提供系列试剂产品

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

我司提供PCR试剂盒的类别有流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠状病毒、轮状病毒、杆菌、链球菌、热带病毒等等核酸检测试剂盒。

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