液相色谱法检测*注射液有关物质

        操作简便、快速，1本试验采用液相色谱法测定*注射液中的有关物质。测定结果准确可靠，从而能有效地控制该药的质量。2流动相的选择上笔者比较了甲醇-水系统、乙腈-水系统、甲醇-磷酸盐缓冲液系统、乙腈-磷酸盐缓冲液系统等，发现*与有关物质不能很好地分离，且色谱图中主成分峰有明显的脱尾现象，方法不合理。后来试加入醋酸缓冲液，结果能使*与有关物质达到良好的分离，并消除了主峰脱尾现象。3主药的稀释溶剂选择上，考虑到*易溶于水，笔者比拟了用流动相和水作为溶剂进行了检测，发现两种供试样品的色谱图中，主峰与有关物质都能达到很好的分离，且检测结果无明显差异。为方便操作和节约成本，笔者选用纯化水作为稀释溶剂。

        流速1.0ml/min检测波长269nm进样量20μl结果在该色谱条件下，摘要】目的建立液相色谱检测*注射液有关物质的方法。方法采用CromasilC18色谱柱（4.6mm150mm5μm以水-乙腈-醋酸缓冲液（pH6.1即取醋酸钠10.92g加水100ml用冰醋酸调至pH6.158320.5为流动相。*注射液在5.3535.22μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9999n=5结论本法灵敏、准确、简便，可作为*注射液有关物质的检测方法。

        关键词：*；注射液；有关物质；液相色谱法

         肿瘤组织内受嘧啶核苷磷酸化酶的作用转化为游离的5-氟*而显示抗肿瘤作用。由于这种酶的活性在肿瘤组织内较正常组织为高， *（Deoxifluridin为5-氟*的衍生物。且专一性强，故本品在肿瘤内转化速度快、浓度高，对肿瘤具有较高的选择作用。临床用于胃癌、大肠癌、乳腺癌、子宫颈癌、膀胱癌。*疗效高，毒性小，一个具有特色的*的较好的抗癌药。本研究采用HPLC法，建立了*注射液中有关物质的测定方法。

1仪器与试药

        自动进样器，Agilent1100液相色谱仪（四元泵。紫外检测器，惠普色谱工作站，真空脱气机）美国安捷伦公司）*对照品（江苏省药品检验所标定）含量99.6%供试品（自制，批号：060114060115060116甲醇（色谱纯）其余试剂为分析纯，水为超纯水。

2方法与结果

        *的保管时间约为4.3min理论板数不低于1000*与相邻物质峰的分离度大于1.52.1色谱条件色谱柱：DiamonsilC18液相色谱柱（4.6mm150mm5μm流动相：水-乙腈-醋酸缓冲液（pH6.1即取醋酸钠10.92g加水100ml用冰醋酸调至pH6.158320.5流速：1.0ml/min检测波长：269nm进样量：20μl柱温：25℃。上述色谱条件下。

         用水稀释制成约含*0.1mg/ml供试品溶液，2.2专属性试验精密量取*注射液适量。进样20μl记录色谱图。另精密称取*对照品适量，用水溶解并稀释制成浓度为0.1mg/ml对照品溶液，进样20μl记录色谱图。取空白溶剂水及流动相直接进样20μl记录色谱图。由色谱图可见，溶剂对*测定无干扰。

         加水适量，2.3有关物质线性关系试验精密称取于105℃干燥至恒重的*对照品约50mg于50ml量瓶中。振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液1.0ml1.0ml1.0ml1.0ml05ml依次置于25ml50ml100ml200ml200ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取各浓度溶液20μl注入液相色谱仪，记录峰面积（A以峰面积A对浓度C进行线性回归，得回归方程为A=34581C+518.17r=0.9999n=5线性范围为53535.22μg/ml

         稀释至约4μg/ml进样20μl测定色谱系统基线。按信噪比为3测得*检测限为36ng/ml2.4zui低检测限取“线性关系”项下的对照品溶液。

         精密称定，2.5精密度试验取*对照品适量。加水溶解并稀释至约0.1mg/ml溶液，进样20μl重复进样6次，记录色谱图，结果峰面积的RSD为0.46%标明该溶液进样精密度良好。

        于室温下放置0246810和12h后，2.6稳定性试验取上述精密度试验项下的样品溶液。分别进样20μl峰面积的RSD为0.53%标明该溶液12h内稳定。

        按处方比例加水制成80%100%120%共3种浓度的溶液，2.7回收率的测定精密称取*对照品适量。按上述色谱条件测定。以加入量与测得量的比值，计算回收率。结果低、中、高3种浓度溶液的回收率分别为99.8%100.1%99.6%RSD分别为0.56%0.48%0.62%平均回收率（n=9为99.8%

        加水稀释至刻度，2.8*注射液中有关物质的检测精密量取*注射液适量（约相当于主药25mg置于250ml量瓶中。摇匀，作为供试溶液；精密量取供试溶液1ml置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%25%另精密量取上述两种溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，量取各杂质峰峰面积之和，不得大于对照溶液主峰面积1.0%