填充柱是指填充了固定相的色谱柱。将色谱分析的固定相(吸附剂、涂渍了固定液的载体、离子交换树脂、凝胶颗粒等)作为填料,填充于一定口径、长度和形状的柱管中。填充柱的优点是制备和使用方法都比较容易掌握,具有多种填料可供选择,能满足一般样品分析要求。
一、气相填充柱的平衡
气相填充柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗气相填充柱。一定确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。
每天用足够的时间以流动相来平衡气相填充柱,就会在处理问题方面获得zui大的"补偿",而且气相填充柱的寿命也会变得更长。
二、气相填充柱的保养
气相填充柱在使用前,*行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是jia条件),只有这样,测得的结果才有可比性。在对气相填充柱使用前进行测试以后,要根据不同的情况对色谱柱进行保养:
①每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
②*保存气相填充柱:如气相填充柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,可以储存于水(含防腐剂die氮hua钠或柳硫汞)中,并将购买新气相填充柱时附送的堵头堵上。储存的温度hao是室温。
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