近日,我公司技术员在科研血清技术交流平台中,看见一位实验新手提出疑问:细胞培养实验出现黑点是不是被污染了?此问题也是细胞培养实验的常见问题之一,我公司技术员针对此问题解析道:
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
而如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
1.细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
2.血清质量不好,反复冻融的结果;
3.配制培养基的ph值偏高,不宜细胞生长;
4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
5.培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
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