用于
分光光度计的光度准确度测试的材料, 应该是纯度高、稳定性好的物质。这些物质中较主要的是铬酸钾( K2 CrO4 , 一般在碱性溶液中)、重铬酸钾( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸钾、中性滤光片等。在碱性溶液中的铬酸钾是一种好材料, 但是因为含有碱性, 不能储藏在普通玻璃容器中, 而需要储藏在石英器皿中, 硝酸钾本身不大稳定。这些都限制了它们的使用。因此, 建议选择易于纯化又溶于酸性介质中的物质, 并且它们的稀溶液也是很稳定的。因此, 重铬酸钾的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液经常被使用。许多科学家认为, 用紫外滤光片来测试分光光度计的光度准确度, 具有很大的优点。因为它们的稳定性更好, 又便于携带, 还有许多优点将在后面讨论。
分光光度计的光度准确度测试方法, 目前国内外各生产厂家作法不一, 其主要原因是各国的国家标准不同; 如美国国家标准规定: “选择合适的标准参比材料, 在规定的波长处, 连续测10 个吸光度或透射比读数, 取10个读数的平均值, 实际吸光度或透射比与观测值的平均值之差, 即为光度准确度”。美国国家标准还规定了计算光度准确度的标准偏差S 的方法; 规定指出吸光度准确度用AA 表示, 则有式( 4-10) 、式( 4-11) 中, S 为标准偏差; Ai或Ti为每次测量时吸光度或透射比的读数值; Aa或Ta为吸光度或透射比的平均值; n为测量次数( 一般取5～7 次)。
