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鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)ELISA试剂盒

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所  在  地上海

更新时间:2022-08-12 11:20:13浏览次数:73次

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鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)ELISA试剂盒,采用酶连免疫法检测样本中的鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)的浓度

中文名称:鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)ELISA试剂盒

英文简称:Chicken SMAC ELISA Kit

检测样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体


血清:不含抗凝剂的/含促凝剂。(通常为红色、黄色、橘色管盖的)

血浆:含抗凝剂。(通常为绿色、紫色管盖的 )

样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。


虽然 ELISA 的操作步骤是相同的,但每次实验的各种影响因数都是有所变化的,所以每次实验时必须重新制作标准曲线,以便得到更准确可靠的检测结果。如果需要做多次实验,溶解后的高浓度标准品可以分装保存于-20℃,避免反复冻融,有效期内用掉。  

ELISA 实验通常以细胞培养上清液、血清、血浆以及组织裂解物等为样品。该实验三种试剂:固相的抗原或抗体;酶标记的抗原或抗体;酶作用的底物。根据样品的性质、检测的实验条件、试剂的来源,可设计出不同类型的ELISA检测方法。


一、直接ELISA

   原理:将抗原与固相载体连接,洗涤除去未结合的抗原及杂质。加酶标抗体进行孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。加底物反应。直接法主要用于测定抗原。



   优点:操作流程简短,实验步骤少;无需使用二抗,避免了交叉反应;实验步骤少,操作不易出错。

   缺点:实验中的一抗需要直接用酶标记,成本相对较高。


二、间接法ELISA

    原理:将抗原与固相载体相连结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。加入特异性一抗与固相抗原相结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,加酶标二抗。固相免疫复合物中的抗体与酶标二抗结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,加底物显色。


   优点:酶标二抗可加强信号,提高灵敏度;灵活性更大,同一酶标二抗可应用于多种不同的一抗;不直标一抗,可保留更多的免疫反应性;成本更低,使用标记抗体更少。

   缺点:交叉反应几率升高。


三、双抗夹心法ELISA

   原理:双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子,但不适用于小分子抗原。将特异性抗体(捕获抗体)与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。加入待检样品,保温孵育。样品中的特异性抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。加酶标抗体(检测抗体)保温孵育。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。加底物反应。

双抗原夹心法测抗体的反应模式与测抗原相似,用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。



   优点:高特异性,使用的捕获抗体与检测抗体都是检测特异性的;适用于复杂样品,抗原不需要进行纯化即可用于检测;灵活性更大,灵敏度更高,可采用直接法也可采用间接法。
  缺点:检测物需要拥有两个以上不同的抗原表位或多个相同的重复表位;不适用于检测小分子物质。


四、竞争法ELISA

   原理:竞争法ELISA为复杂,通常用于检测小分子如半抗原、激素、药物等。样品中待检游离抗原与固定于固相载体上的抗原一起竞争相同的有*抗体,当样品中的游离抗原越多,就可结合越多的抗体,而固相抗原只能结合较少的抗体。反之亦然。经洗涤去除样品中的抗原与抗体的结合物,只留下固相抗原与抗体的结合物。显示经计算可得样品中抗原的含量。竞争法可根据实验设置直接法、间接法或夹心法形式。





友情提醒:                                        

试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!

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