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UNchained UNcle 高通量蛋白稳定性分析仪

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更新时间：2023-08-24 15:51:55浏览次数：42次

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产品简介

产品介绍：美国Unchained高通量多功能蛋白稳定性分析仪Unit/Uncle是得到蛋白分子结构稳定性、聚集稳定性、胶体分散稳定性等多种类型数据的设备

详细介绍

产品介绍：

美国Unchained 高通量多功能蛋白稳定性分析仪Unit/Uncle是得到蛋白分子结构稳定性、聚集稳定性、胶体分散稳定性等多种类型数据的设备。该设备既能使用经典方法处理数据，又新增多种分析模式；既可获得单一类型数据，又可对多种类型数据同时测定整合分析；既保证了数据质量，又实现了数据种类和通量；并且样品用量少，操作简单快捷，更能够解决蛋白样品数据获得过程中的问题。以此近期多篇利用该设备得到的实验结果高质量文献发表。

一、产品参数

1. 基于内源性荧光、动态光散射和静态光散射原理；

2. 可测定Tm（变性温度）；

3. 可测定Tagg（聚集起始温度）；

*4. 可测定Sizing（蛋白颗粒直径即粒度）和PDI（分散度）；

*5. 可测定B22(第二维里系数)、kD（扩散系数）；

*6. 可一次测定1~48个viscosity（黏度）；

7. 可测定ΔG（吉布斯自由能变）和ΔG Trend（自由能改变趋势）；

8. 可用于研究蛋白Isothermal stability（等温稳定性）、Thermal recovery（热恢复实验）；

*9. Tm值计算模型可采用350/330比值法、曲线下面积法、质心波长法以及发射峰法4种方法计算；

10. 依据蛋白内源性的芳香族氨基酸的荧光改变测定Tm时，无需添加化学染料；

11. 也可根据蛋白具体需求添加特异性蛋白染料如ANS， SYPRO Orange等；

12. 不同样品/制剂条件在独立样品池中封闭检测，不存在交叉污染的可能；

*13. 粒度检测范围：0.3-1000 nm；

14. 可测定蛋白样品浓度范围：50 µg/ml ~150 mg/ml（以IgG为例）；

*15. 一次可同时测定1~48个样品，每个样品≤9 uL；

16. 温度控制范围：15℃-95℃；

*17.升温速度0.01-10℃每分钟；

18. 温度控制精度0.01℃；

*19. 配有270nm~720nm全光谱高灵敏CCD；

*20.配备266nm、473nm和660nm三根激光器；

21. 配备简单易用的操作软件和功能强大的分析软件；

22. 仪器无需要定期更换的配件，实验完成后不需要对仪器进行清洗维护；

二、仪器设备工作原理

（1）工作原理

采用蛋白分子中芳香族氨基酸内源性荧光检测蛋白结构稳定性（Tm），蛋白分子变性过程中，其结构逐渐打开（unfold），疏水结构域逐渐暴露于水性环境，包埋于疏水位点的芳香族氨基酸其荧光发射属性改变，从而可以得到蛋白变性曲线，定量计算出Tm；采用静态光散射（SLS）技术检测蛋白聚集稳定性，蛋白变性过程中，其结构逐渐打开，疏水位点逐渐暴露，达到一定程度（温度）时，蛋白分子开始聚集，导致散射光信号增加，从而确定蛋白聚集起始温度。此外，采用动态光散射（DLS）进行粒度及粒度分布分析，黏度分析以及胶体分散稳定性分析（B22和kD）。

（2）与传统方法的分析

现有蛋白/抗体/疫苗稳定性检测技术及方法主要包括：孵箱法结合分子排阻层析（SEC）、PCR技术（染料法）、DSC技术和DSF技术（染料法）。（1）孵箱法结合分子排阻层析（SEC）。通常将孵箱设置为30~40℃，将候选蛋白/抗体/疫苗分子及/或不同制剂配方放置于孵箱中，定期取样观察/检测，基于终点法检测，应用极为普遍，可以称之为“金标准”，但工作量大，任一个候选药物分子或者制剂配方均需要多份重复，以便不同时间取样检测；并且该方法时间周期较长，通常需要半年或更久；样品用量较大。（2）PCR技术基于染料法检测蛋白结构稳定性，通常采用SYPRO Orange，蛋白在加热过程中逐渐变性，疏水结构域逐渐暴露，荧光染料与蛋白疏水结构域结合并且荧光发射属性改变，尤其获得蛋白变性曲线，可定量计算出蛋白变性温度（Tm）。该方法优点为通量较高，蛋白用量少，检测成本低。但随着技术进步，该方法在工业领域应用逐渐被替代，其缺点主要为基于蛋白染料检测，间接检测方式，蛋白变性过程中染料基于疏水作用与蛋白吸附，这种相互作用存在影响蛋白变性过程的可能，从而导致检测结果偏差。（3）DSC技术在蛋白/抗体稳定性分析中比较经典，可定量测定蛋白变性温度和变性起始温度，工业领域应用广发。但是该方法存在样品用量大（130uL，26ug）、通量低（一次实验1个样品，24小时全自动化仅能分析50个样品）；单一样品池，存在交叉污染可能。（4）DSF技术最初应用于PCR为代表的染料法，近几年也逐渐摒弃染料，采用类似UNcle的检测方法，即基于蛋白芳香族氨基酸的内源性荧光，也能做到高通量和多参数，样品微量化。但其存在的缺点也非常明显，Tm检测数据分析模型单一，仅仅依赖于比值法（350nm/330nm），聚集稳定性分析技术薄弱，没有粒度分布分析、黏度分析、胶体分散稳定性分析。等温稳定性分析等等。此外，以上所有技术或方法均存在检测参数单一的问题，而生物大分子稳定性分析及其制剂开发需要多方面检测，包括结构稳定性分析，聚集稳定性分析，胶体分散稳定性分析，粒度分布分析，黏度分析等等。UNcle高通量多参数蛋白稳定性检测与制剂开发系统具备所有以上特征，同时兼具高通量、样品微量化特点，可成倍提升工作效率。

三、仪器设备在国内外使用情况

UNchained Labs是一家、也是目前一家专注于开发并提供蛋白/抗体稳定性分析以及生物制剂配方筛选与评价工具与解决方案的公司；UNchained Labs公司拥有的工业与行业监管用户，包括美国食品（FDA）、美国国立卫生研究院（NIH）、亚力兄制药（Alexion），百时美施贵宝（Bristol Myers Squibb），礼来（Eli Lilly），基因泰克（Genentech），吉利德（Gilead），葛兰素史克（GlaxoSmithKline），诺华（Novartis），辉瑞（Pfizer），罗氏（Roche），赛诺菲（Sanofi），安进（Amgen），雅培（Abbott），艾伯维（AbbVie），拜耳（Bayer），杨森（Janssen），龙沙（Lonza），默克（Merck）等；国内用户包括中检院、百奥泰、绿叶制药、恒瑞研发、苏州信达、康宁杰瑞、德思特力、华博生物、强生中国研发中心、宝船生物、上海肿瘤研究所、苏州大学、清华大学、中国计量、舒泰神、义翘神州、军科华仞、中国农业大学等。装机超过150套，国内超过20套。

四、仪器设备与同类仪器设备的比较分析（提供不少于三家国内外厂商同类型仪器设备性能、价格比较）；

蛋白稳定性检测与制剂开发系统主要型号的性能参数对比

序号	产品	技术参数内容	产品	其次产品	第3产品
	型号		UNcle	Prometheus NT.48	NanoDSC
	厂商		Unchained Labs	Nano Temper Technologies	TA
	主要指标参数
1	★	2. 可测定Tm；	√√√	√	√√√
2	▲	3. 可测定Cm、ΔG、Tagg；	√√	√	X
3	▲	7. 对测定缓冲液条件无限制，可测定在去垢剂环境中的膜蛋白；	√	√	√
4	▲	9. 配备蛋白聚集检测模块；	√√√	√	X
5	▲	10.可测定蛋白样品浓度范围：下限≤100 µg/ml ，上限≥ 200 mg/ml；	可测定蛋白样品浓度范围：50µg/ml - 150 mg/ml √	可测定蛋白样品浓度范围：5 µg/ml – 250 mg/ml √√	可测定蛋白样品浓度范围：100 µg/ml – 2 mg/ml X
6	▲	11. 一次可同时测定≥48个样品，每个样品≤10 uL；	一次可同时测定48个样品，每个样品9uL √√	一次可同时测定48个样品，每个样品10 uL √	一次可测定1个样品，每个样品130 uL X
7	▲	14. 可获得高分辨率数据，每个样品1分钟内可获得≥100个数据点；	全光谱扫描，每个样品1分钟内可获得＞1000个数据点 √√√	每个样品1分钟内可获得10个数据点X	每个样品1分钟内可获得10个数据点 √
8	▲	15. 24小时可测定≥1000个样品；	24小时可测定大于1000个样品√	24小时可测定最多1000个样品√	24小时可测定最多50个样品 X
9	▲	16. 配备粒度及黏度分析模块	√√√	X	X
10	▲	17. 一次实验48个样品可同时分析Tm、Tagg及粒度	√√√	X	X
11	▲	18. 光谱扫描及数据分析；	270nm~720nm全光谱扫描，Tm值4种分析模型√√√	330nm及350nm双波长检测，Tm值一种分析模型350/330 X	X
12	▲	19. 可随意选择label-free检测方式或labeled检测方式，兼容非染料法和染料法；	√√√	X	X
13	▲	20. 配备3支激光器；	3支激光器，266nm用于静态光散射和内源性荧光激发，473nm用于静态光散射和染料激发，660nm用于动态光散射粒度检测和黏度、B22、kD检测√√√	X	X
14	▲	21. 原厂技术支持团队确保售后质量和服务连续性；	亚太总部位于上海，原厂团队服务√√√	临时代理商，随时有终止代理协议可能X	原厂团队服务√√√
15	▲	22. 国内用户基础；	＞150家用户，国内＞15家用户√√√	国内无制药用户X	＞100家用户，国内至少10家用户√√√