流式细胞术-雅吉简述

        流式细胞术-雅吉简述

        现代流式细胞术综合了流体力学技术、激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、荧光化学技术及单克隆抗体技术，是多学科多领域技术进步的结晶。随着现代科技的高速发展，为了满足生命科学对细胞分析更高层次的要求，流式细胞技术仍然在快速发展，并已经在检测技术、分选技术及高通量分析等方面取得了许多突破。

       用流式细胞术可进行多参数分析，即同时测定一个细胞的多种性质。如散射光和荧光，或多种不同颜色的荧光。例如细胞经吖啶橙染色后，DNA发绿色荧光，RNA发红色荧光。测定这两种荧光就能同时得知一个细胞内的DNA和RNA含量。测定结果可用二维散点图或三维立体图表示。用这种方法可根据DNA和RNA含量而鉴别出G0与G1、M期和 G2期细胞。用流式细胞术与液体闪烁技术相配合,还可求得细胞通过G1、S和G2 M期的时间（T、Ts、T M及其变异系数。近年利用抗溴脱氧尿苷（Brdurd）单克隆抗体能发现渗入到细胞 DNA内的溴脱氧尿苷。

        将此种荧光抗体技术与测定细胞 DNA含量相结合，是研究DNA合成和细胞周期的一种非常有用的技术。此外,流式细胞术还可测定细胞群体同步化的程度和所处的时期，鉴别死细胞和活细胞，利用荧光标记配体，还可定量测定细胞表面和内部的受体等。 　　
         流式细胞术可用于测定细胞周期各时相细胞的百分比。通过测定细胞群体中每个细胞的DNA含量，得出DNA含量分布曲线。例如，在测定Hela细胞DNA含量分布曲线上，个峰是含有2CDNA含量的G1/G0（DNA合成前期/静止期）细胞,其次一个峰是4CDNA含量的G2 M（DNA合成后期＋有丝分裂期）细胞，从2C～4C间的区域为S期（DNA合成期）细胞。采用绘图法或计算机拟合法可计算出细胞周期各时相细胞占整个细胞群体的百分数。

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