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鸭母亲DDP同源物2(Smad2)ELISA试剂盒

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  • 公司名称上海茁彩生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       号
  • 所  在  地上海
  • 厂商性质
  • 更新时间2022/8/12 11:18:45
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ELISA试剂盒、生化试剂盒、细胞检测试剂盒、核酸产品、外包服务和其它相关配套试剂
鸭母亲DDP同源物2(Smad2)ELISA试剂盒,采用酶连免疫法检测样本中的鸭母亲DDP同源物2(Smad2)的浓度
鸭母亲DDP同源物2(Smad2)ELISA试剂盒 产品信息

中文名称:鸭母亲DDP同源物2(Smad2)ELISA试剂盒

鸭母亲DDP同源物2(Smad2)ELISA试剂盒检测样本:血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆及相关生物液体

血清:不含抗凝剂的/含促凝剂。(通常为红色、黄色、橘色管盖的)

血浆:含抗凝剂。(通常为绿色、紫色管盖的 )

样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(3个月内检测),避免反复冻融。在检测前,冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。


细胞样本裂解方案

贴壁细胞裂解方法

单层贴壁细胞总蛋白的提取:

1、倒掉培养液。

2、每瓶细胞加5ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1min洗涤细胞,然后弃去洗液。重复以上操作两次,共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS弃净后把培养瓶置于冰上。

3、按1ml裂解液加10 μl PMSF(100mM),摇匀置于冰上。(PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。)

4、每瓶细胞加400 μ 含PMSF的裂解液,于冰上裂解30min,为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动。

5、裂解完后,用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧(动作要快),然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5ml离心管中。(整个操作尽量在冰上进行。)

6、于4℃下12000rpm离心5min。(提前开离心机预冷)

7、将离心后的上清分装转移倒0.5min的离心管中放于-20℃保存。


悬浮细胞裂解方法

1. 培养1×106-1×107个细胞;

2. 将细胞转移到15ml圆形离心管,4?C, 500g离心5min;

3. 小心去除上清,加入5ml预冷PBS重悬细胞,4?C, 500g离心5min;

4. 尽可能多的去除上清,小心不要碰到细胞沉淀。

5. 在上步骤获取的细胞中,加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer。

6. 吹吸混匀8-10次,冰上孵育5min;

7. 将所有细胞转移到1.5ml离心管;

8. 4?C, 14000g(离心机大转速)离心10min;

9. 将上清转移到新管中。该上清可立即用于检测或者保存在-80?C。

10. 按照多因子检测试剂盒操作方法检测。样本孔加入25ul细胞裂解液和25ul Universal Assay Buffer。


可选步骤:

  建议细胞裂解后上清进行蛋白定量检测。我们推荐使用Lowry法蛋白定量检测。建议将所有样本使用预冷的ProcartaPlex Cell Lysis Buffer调整样本蛋白浓度方为4-8 mg/ml。



















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