上海雅吉生物科技有限公司

主营产品: 免疫组化试剂盒,对照品,抗体,细胞血清,Elisa试剂盒

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公司信息

人:
高杰
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上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室
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https://www.huajx.com/st53694/
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组织切片的免疫荧光标记实验

2016-9-20  阅读(133)

提 供 商 上海雅吉生物科技有限公司 资料大小 55KB
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【详细说明】

实验材料    组织样品
试剂、试剂盒    PBS抗体
仪器、耗材    玻片加湿盒
实验步骤    
1.  将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒,由冰冻切片仪中取出载有切片的载玻片,放入玻片盒中(每边放6片),或故湿盒中(载玻片勿相互接触)。
 
2.  待载玻片达室湿且未干时,铺加PBS于切片上(勿溢出玻片)。
 
3.  稀释的*杭体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min(每一载玻片上加40~50 μl 抗体,应能盖住切片)。
 
4.  用与泵相连的巴斯德吸管,在切片的一端吸去玻片上的PBS,并从另一端加上抗体,盖上加湿盒,室温温育1 h。

5.  以PBS冼玻片3次(5 min/次),从切片一端加入新的PBS缓冲液,由另一端吸去旧的缓冲液。
 
6.  稀释的第二抗体于4℃用微量离心机以13 500 g 离心2 min(每载玻片可加40~50 μl 抗体)。
 
7.  将第二抗体加于切片上,置加湿盒中室温温育1 h,以PBS洗玻片3次(5 min/次)。
 

图一、免疫组化标记的各种方法
 
8.  将盖玻片放于纸巾上,滴加1滴Gelvatol 于盖玻片*。翻过载玻片放于盖玻片上(勿施压),将玻片置工作台上,用铝箔覆盖避光放置30 min,使Gelvatol 凝结。
 
9.  显微镜下观察结果,或置玻片盒中贮于4℃。



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