小鼠TNFα检测试剂盒

产品名称 TNFα（m） ELISA kit
特异性 系统和其它细胞因子无交叉反应。
检测标本 血清、体液、组织匀浆或细胞培养上清
检测范围 15.6pg/ml→1000pg/ml (细胞培养上清)； 7.8pg/ml→500pg/ml(小鼠血清、血浆等)。
敏感性 ＜1pg/ml
保存条件 4℃六个月，-20℃一年。
小鼠TNFα检测试剂盒
背景资料 Tumor necrosis factor α，TNFα，肿瘤坏死因子α。TNFα前体是以跨膜蛋白的形式存在于细胞内，在细胞外被剪切成17KDa的成熟形态（157个氨基酸）。活性的TNFα以非共价键二聚体、三聚体甚至五聚体的形式存在，但在SDS-PAGE显示为单一17KDa条带。很多细胞都能合成TNFα，包括各种免疫细胞（单核细胞、巨噬细胞、T、B细胞、粒细胞、NK细胞）和非免疫细胞（上皮细胞、纤维细胞、肌细胞、Kuppfer细胞等）。TNFα的合成受到很多因素的影响。其功能zui早认为是有抗肿瘤活性，现在已明确不仅能调节肿瘤细胞的生长，对很多细胞的生长、分化和代谢都有影响。TNFα是免疫宿主反应的快速反应因子。其另一特点是在免疫疾病中理性作用。

小鼠TNFα检测试剂盒标准曲线可以绘成直线或是曲线(二次方程或三次方程)。通常是选取线性比较好的几个点绘成直线。直线斜率越高说明抗体的特异性及灵敏性好，R2值越靠近1，则说明线性关系好。曲线绘好后，有一些常用的参数，如抑制率、半数抑制、检测限、定量限、标准偏差、变异系数等等：

  1.抑制率(%)＝1－B/B0(B0为不含药物的OD值；B为含有药物的OD值)

  2.标准差(SD)＝[∑(Xi－B)2/(n－1)]1/2；

  3.标准偏差(RSD)＝SD/B

小鼠TNFα检测试剂盒半数抑制：指用药物(半抗原)去做竞争实验时呈现50%抑制效果时的药物浓度。药物浓度越低，而抑制率越高，则表示抗体对药物的特异性越好，灵敏度也高。

  半数抑制浓度IC50对应的OD值：OD IC50＝0.5 B0

  检测下限(LOD)对应的OD值：ODLOD=B0－3SD；

  定量限(LOQ)对应的OD值：ODLOQ=B0－10SD

间接ELISA操作中具体注意的问题

  间接ELISA一般有6个步骤：小鼠TNFα检测试剂盒包被抗原、封闭、加一抗(在做竞争时同时加入药物)、加二抗、显色、终止。其中除了加显色和终止外，其余步骤之间都要进行洗板。在这里面，每一步都非常重要，假如有一步疏忽都会造成结果的不准确。通常ELISA结果会出现如空白显色、阴性偏高、方阵梯度不明显，还有如何提高间接竞争ELISA灵敏度等问题。