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上海信裕生物科技有限公司
主营产品： ELISA试剂盒，检测试剂盒，白介素试剂盒，试剂盒，重组蛋白，单克隆抗体，多克隆抗体，细胞系，原代细胞，胎牛血清，生化试剂，实验室耗材，abcam抗体等科研产品 |
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2016-11-18 阅读(165)
哪种抗原修复方法好些，修复时间和温度如何确定？
1）抗原热修复
（1） 高压热修复 在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01M*缓冲溶液（pH6.0）。盖上不锈钢高压锅的盖子，但不进行锁定。将玻片置于金属染色架上，缓慢 加压，使玻片在缓冲液中浸泡5分钟，然后将盖子锁定，小阀门将会升起来。10分钟后，去除热源，置入凉水中，当小阀门沉下去后打开盖子。本方法适用于较难 检测或核抗原的抗原修复。
（2）煮沸热修复 电炉或者水浴锅加热0.01M*缓冲溶液（pH6.0）至95℃左右，放入加热10~15分钟。
（3） 微波热修复 在微波炉里加热0.01M*缓冲溶液（pH6.0）至沸腾后将切片放入，断电，间隔5~10分钟，反复1-2次。适用的抗原 有：AR，Bax，Bcl-2，C-fos，X-jun，C-kit，C-myc，E-cadherin，Chromogranin A，Cyclin，ER，Heat shock protein，HPV，Ki-67，MDMZ，p53，p34，p16，p15，P- glycoprotein，PKC，PR，PCNA，ras，Rb，TopoismeraseⅡ等。
2）酶消化方法
常用 0.1%*和0.4%*液。*使用前预热至37℃，切片也预热至37℃，消化时间约为5~30分钟；*消化37℃时间为30分 钟。适用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen，Complement，Cytokeratin，C-erB-2，GFAP，LCA，LN等。
